PROPAGACION IN VITRO

La biotecnología permite reproducir las orquídeas preferidas o salvar aquellas en etapa de extinción. En nuestro país, uno de los laboratorios más modernos se encuentra instalado en Caacupé, donde los especialistas del IAN y la Misión Técnica China desarrollan la propagación de diferentes especies con gran éxito.

El principal objetivo de la propagación de las orquídeas por medio de la biotecnología o cultivo in vitro, para el IAN y la Misión Técnica China, es reproducir las plantas preferidas o salvar aquellas en etapa de extinción. El método de multiplicación dependerá de los objetivos.

- Multiplicación vegetativa: Se logra a través del cultivo de tejidos utilizando el meristema como explante inicial. La ventaja que presenta este sistema es que las plantas son idénticas a los progenitores.

- Multiplicación por semilla: Con este método se obtiene gran cantidad de plantas, las cuales tendrán variación con respecto a sus progenitores.

- Multiplicación por pedúnculos florales: Se utilizan las yemas de varas florecidas, y las plántulas resultantes tienen las mismas características genéticas que su progenitor.

MULTIPLICACION VEGETATIVA

Se seleccionan bulbos con hojas jóvenes de orquídeas (15 cm. de largo) y se separan cuidadosamente de la planta madre con la ayuda de un bisturí estéril; se corta la hoja grande y se deja la base de unos cuatro centímetros.
Ya en el laboratorio se debe realizar la desinfección, primeramente con alcohol 70% por unos segundos, luego con hipoclorito de calcio al 1% por 10 minutos y tres lavados con agua destilada esterilizada.
Después de realizar los lavados en la cámara de flujo laminar se debe proceder al corte de ápices meristemáticos con la ayuda de un estereoscopio con un tamaño de 0,8 mm. y colocar en tubos de ensayo con medio de cultivo líquido.
Estas plántulas se subcultivan (cambio a un medio fresco) cada dos meses, hasta llegar a un tamaño de 5 a 8 cm. en unos 8 meses cuando están listas para el trasplante.

MULTIPLICACION POR SEMILLAS

Las semillas de orquídeas son pequeñas en extremo, estimándose que una sola vaina del género Cattleya contiene unas 30.000 de ellas. Un punto importante a ser tenido en cuenta en el sistema de multiplicación es el tiempo adecuado para la cosecha de la cápsula o vaina; esta debe tener un 60% de madurez. En el caso de Cattleyas y Catasetum, puede durar unos siete meses, ya que poseen cápsulas más grandes.
El género de la Phalaenopsis, entre cuatro y cinco meses y aquellas que tienen cápsulas muy pequeñas, como algunas nativas, el tiempo recomendado para la cosecha es de tan solo tres meses. En la práctica, la cápsula debe tener un ligero cambio de color, del verde oscuro a un verde amarillo, siempre sin llegar a la apertura de la cápsula.
En la cámara de flujo laminar, las cápsulas se sumergen en alcohol 96% y se flamean por unos segundos; esto se repite dos a tres veces con el fin de realizar una esterilización superficial.
A continuación, se debe cortar la cápsula en dos, en una placa de petri estéril, y proceder a raspar las semillas con la ayuda del bisturí o una cucharilla, sembrando en el medio de regeneración que contiene todos los elementos nutritivos que necesitan las semillas para germinar. Los frascos se deben mantener en la cámara de crecimiento con luz difusa y temperatura de 24 a 26ºC. Aproximadamente a los dos meses se observa un cambio de coloración de las semillas de blancoamarillento a verdeamarillento, que son las semillas en proceso de germinación.
Dos meses después se debe realizar el subcultivo (cambio de medio de cultivo fresco). Los siguientes subcultivos se deben realizar cada dos meses, por un periodo de ocho meses.
Cuando las plántulas tienen un tamaño de 4 a 6 cm. de alto ya pueden trasplantarse. Las plántulas deben ser extraídas cuidadosamente de los frascos y ser lavadas con agua corriente con mucha delicadeza, para no lastimar las raíces; se deben sumergir en una sola solución de Benlate de 1 g/litro/10 minutos.
Las plantas más grandes deben ser trasplantadas en macetas con 50% de carbonillas y 50% de chachi. Es muy importante el buen drenaje del agua, que se escurra bien, de manera que no facilite la pudrición de las raíces.

MULTIPLICACION POR PEDUNCULOS FLORALES

Otra opción importante a ser tenida en cuenta para la multiplicación de las plantas de orquídeas es la utilización de las yemas que se encuentran en la vara floral por debajo de las flores ya abiertas.
Este sistema tiene la desventaja de que el material disponible para el trabajo es muy limitado, dependiendo exclusivamente de la cantidad de yemas que se encuentran en una vara.
Las yemas se deben cortar a 2 cm. bajo las mismas, ser desinfectadas con alcohol 70% por unos minutos y luego con hipoclorito de calcio al 1% por 10 minutos. Posteriormente se deberán realizar tres lavados con agua destilada estéril en la cámara de flujo laminar.

Ing. Agr. Marta Bartrina,
técnica investigadora del IAN